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上海埃泽思生物科技有限公司
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人间充质干细胞成软骨分化试剂盒(上海埃泽思)

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>= 1

价格

¥1538.00元/套

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人间充质干细胞成软骨分化试剂盒

产品基本信息

产品名称
Applied Cell® 人间充质干细胞成软骨分化试剂盒
货 号
AC-1001028
规 格
基础培养基90mL,添加剂10mL
保存条件
基础培养基 2-8℃,添加剂-20--80℃保存;
混合后 2-8℃保存,3 周内使用完毕
使用范围
人间充质干细胞诱导分化成软骨
保质期
12个月

产品简介

人间充质干细胞成软骨分化试剂盒是埃泽思生物(Applied Cell®)自主研发的一款用于人类间充质
干细胞分化成软骨产品,可用于骨髓、脐带、脂肪等组织来源的间充质干细胞的诱导成软骨分化。

产品特性

 诱导分化程序简单便捷。
 诱导成软骨细胞效率高。
产品内容

试剂
规格
数量
运输
人间充质干细胞成软骨分化基础培养基
90mL
1 瓶
冰袋
人间充质干细胞成软骨分化添加剂
10mL
1 瓶
干冰

操作方法
1. 相关材料

• Xeno-Free 人间充质干细胞培养基(Applied Cell®:AC-1001003)
• 人间充质干细胞成软骨分化试剂盒(Applied Cell®:AC-1001028)
• 成软骨检测染液(Applied Cell®:AC-1001023)
• 细胞消化液(Applied Cell®:AC-1001024)
• 磷酸盐缓冲液(1×) (Applied Cell®: Cat.AC-1001037)
实验准备
人间充质干细胞成软骨分化培养基的配制:

2.1. 在 2-8℃解冻人间充质干细胞成软骨分化添加剂,轻晃摇匀;
2.2. 将添加剂加入到人间充质干细胞成软骨分化基础培养基中(添加剂 10mL 与 90mL 基础培养基彻
底混合)混匀,即为人类间充质干细胞成软骨分化培养基。人间充质干细胞成软骨分化培养基可在 2-8℃稳定储存 2-3 周。
注意:人间充质干细胞成软骨分化添加剂只能在 2-8℃解冻,待添加剂加入到培养基以后,请用
培养基润洗添加剂试管 1-2 次,因添加剂量较少可防止添加剂粘附在试管壁上造成损失。

实验操作

3.1. 诱导成软骨球
3.1.1. 诱导成软骨分化实验之前,用细胞消化液消化后计数;
3.1.2. 分配 0.5 mL 细胞悬液(2-3×105 个细胞)到 15mL 或 50mL 离心管中,300×g,离心 5min;
3.1.3. 吸掉上清,用 2-5mL 人间充质干细胞成软骨分化培养基重悬沉淀。
3.1.4. 离心后拧松离心管盖便于气体交换,置于 37℃,5%CO2 培养箱中培养,第 2 天,细胞团应在离心管底部呈球形的团状;
注意:离心后不需要吸掉上清液,且不要随意晃动离心管。
3.1.5. 自接种时间开始计算,每天更换人间充质干细胞成软骨分化培养基;
注意:每次换液时,轻轻的摇动离心管或轻弹离心管底部确保细胞球没有粘附到管壁上。第 4-5天即会看到非常明显软骨球。
3.1.6. 15-21 天,软骨球停止生长,收获软骨球:吸掉人间充质干细胞成软骨分化培养基,用PBS 洗 1 次。
3.2. 成软骨检测染液染色
3.2.1. 清洗:软骨球用 PBS 清洗 2 次;
3.2.2. 固定:加 2mL 细胞固定液,固定 30min,水洗 2 次;
3.2.3. 染色:成软骨检测染液(AC-1001023)染色 5min;
3.2.4. 洗涤:dH2O 洗去多余的染料,软骨球呈深蓝色。切片染色:
3.2.5. 复水:将诱导分化的软骨球切片浸泡在 100% (vol/vol) 乙醇中 2×5 min, 95% (vol/vol)
乙醇中 1×2min,70% (vol/vol)乙醇中 1×2 min;
3.2.6. 用流动的水冲洗 30s;

3.2.7. 成软骨染料染色 5min;

3.2.8. 用 dH2O 洗去多余的染料;
3.2.9. 脱水:浸泡在 95% (vol/vol) 乙醇中 2×5min,在 100% (vol/vol) 乙醇中 2×5min;
3.2.10. 用二甲苯清洗 3×2 min;
3.2.11. 用中性树胶封片,用显微镜观察并拍照。

诱导成软骨效果图




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