一、 仪器功能介绍
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外泌体分离纯化仪 |
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尺寸 |
长 35cmX 宽 25cmX 高 28.6cm |
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仪器功能 |
1、系统自动清洗(膜与管路) |
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2、系统自动化灭菌 |
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3、外泌体浓缩液自动回收 |
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4、系统制冷功能(开机即启动) |
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BiWriter 外泌体分离纯化仪集成度高:
1、集成自动化臭氧灭菌功能,实现自动化灭菌;
2、集成制冷功能,保持外泌体活性;
3、先进的传感器与操控系统结合,具备自适应过滤压力调控功能,维持高效的外泌体切向流过滤;
4、自动样品回收功能,一键操控浓缩后外泌体的回收;
5、过滤效率高,1H 内完成 500mL 细胞上清液的 20 倍外泌体浓缩富集,4L 内完成 2L 细胞上清的 10 倍外泌体浓缩富集。
BiWriter 外泌体分离纯化仪采用 TFF 分离方法:
外泌体分离方法比较
相比于超速离心法、尺寸排阻色谱法、免疫亲和法、微流控芯片法,超滤法是目前外泌体浓缩分离的最高效方法。鉴于普通超滤容易因滤膜孔堵塞导致难以有效过滤,切向流超滤改变膜表面流体特性可有效减少滤膜孔堵塞,是超滤法中最具商业应用价值的外泌体分离方法。
BiWriter 外泌体分离纯化仪与国内同类型仪器比较
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厂家 |
方法 |
仪器价格 |
耗材价格 |
主要市场局限 |
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头部厂家 A |
TFF |
20W 以上
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极高 (1W以上) |
设备昂贵,10L 浓缩的单次使用成本 1W 以上,适合于规模化的外泌体生产应用 |
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头部厂家 B |
TFF+超声
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20W 以上
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高 |
设备昂贵,处理时间长,适合科研级别外泌体回收。 |
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BiWriter |
TFF |
10W 以下
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低 (200以下) |
设备价格适中,理量0.5-2L,适合中等规模的干细胞 GMP实验室实现细胞培养废液的即刻回收 |
BiWriter 外泌体分离纯化仪纯化后的外泌体检测:
二、 BiWriter 仪器使用介绍
外泌体分离纯化仪自带制冷功能,在仪器开机后通过对过滤板直接制冷,带动整个管路内部的自动降温。该制冷功能的主要目的为保护脆弱外泌体,避免外界环境与仪器过滤过程做功导致的温度上升。
1、 膜装
1、如上图所示,逆时针旋转仪器上部的两个手轮,将过滤隔板抬升。
1.2 、将超滤膜光滑面朝下,从过滤隔板的左侧装入过滤隔板下层(需要保证滤膜与隔板壁留有一定的缝隙,否者压紧后由于膜的重叠作用导致过滤隔板上下层不能有效贴合)。
1.3 、顺时针旋转两个手轮(需交叉或同时旋钮两个手轮,保证上滤板前后同时下降)至上过滤隔板卡入下过滤隔板凹槽内。用力反复旋钮 2 个手轮,至手轮不能用力拧动为止(建议在拧不动后,用仪器配备的长杆卡入手轮并再次拧紧)。
2、 管路连接
如上图所示,将回流与样品回收的(1、2)管路连接至射流器,滤过液(3)管路连接至射流器,进液(4)管路连接至载样瓶,射流器回流口(5)连接到废液缸。
3、 膜清洗
、如上图红框部分所示,选择要清洗的液体总量(如 300ml,500ml)。
3.2 、在灭菌瓶中加入超过清洗量的去离子水(或瓶装娃哈哈纯净水),并将灭菌瓶放在屏幕后的载物台上。
3.3 、点击红框部分的“START”按键,启动仪器的膜与管路清洗功能。
3.4 、清洗完毕后,界面会显示清洗完毕提示即表示已经完成清洗。
4、 过滤前仪器的自动化灭菌
.1 、灭菌瓶中装入 500ml 的去离子水(或瓶装娃哈哈纯净水),瓶盖不得拧紧,保证可将瓶内的气体排��(灭菌时会产生臭氧)。
4.2 、为保证管路连接处的无菌,可在灭菌前,将 1,2,3,4,5 号管路接口喷上 3%过氧化氢,进行连接处的灭菌。
4.3 、将 5 号管路连接到灭菌瓶的回流管。
4.4 、红框部位点击选择灭菌时间,推荐时长为“120min”。点击红框内的“START”按键,启动灭菌程序。
4.5 、灭菌原理:仪器会自动产生臭氧经 0.22μm 滤膜,通过管道 6 进入射流器,与管路内的去离子水均匀混合制备��臭氧水。而后仪器自动开启或关闭管路,将所有的管路进行灭菌。
4.6 、如最求快速灭菌可在灭菌瓶中加入 3%过氧化氢,选择“60min”进行快速灭菌。
4.7 、灭菌过程可观察过滤隔板两侧是否有液体流��并再次交叉拧紧 2个手轮(膜装载时如直接手拧手轮,由于有空气存在导致的拧紧过程中压合效果不是十分理想)。
5、 过滤隔板的耐压测试
1 、点击屏幕右上角的蓝色按键,切换屏幕至过“RUN SETTING”液面,直接点击“START”按键,进行压力测试。
5.2 、运行仪器 5min,期间观察是否有液体从过滤隔板渗��。如有液体渗��,则反复拧紧 2 个手轮,至液体不再渗��。
5.3 、点击“STOP”按键,结束压力测试。通过点击 2 次右上角的切屏按键,跳转回“Filter LOADING”页面。将 5 号管连接至废液瓶,并点击 “PUMP”按键将臭氧水排空。
6、 外泌体浓缩与回收
1、点击屏幕右上角的切屏按键,将屏幕切换至“RUN SETTING”页面。
6.2 、将经过高压灭菌的样品瓶取��,将 4 号管与样品瓶的进液口连接,1 号管与样品瓶的回流口连接,2 号管与收集瓶连接,3 号口与滤过液收集瓶连接(样品瓶、收集瓶、滤过液瓶瓶盖不得旋死,保证常压状态)。注:样品瓶必需放在屏幕后的载物台上,系统在浓缩过程中才能感应液体变化,并依据设定的参数自动结束浓缩过程。
6.3 、将经过 0.22μm 滤膜过滤除去细胞碎片的细胞培养液加入样品瓶中。设置相应的参数:选择好样品的体积,浓缩倍数,及过滤压力。点击“START”按键,开始外泌体浓缩。
6.4 、浓缩过程中“RUN SETTING”页面的下半部分会实时更新并显示参数。其中压力、速度、滤��体积每隔 1S 更新一次,图表每隔 10S 更新一次。
6.5 、备注:A、另外一种接法为 1 号管保持原样,将样品瓶与 5 号管连接(此时 6 号管可以吸入经过 0.22μm 过滤的空气,补充样品瓶因滤��导致的瓶内压力损失。)B、如仅收集滤��液,可保持 1,2 好管原连接不动,5 号管连接至样品瓶,3 号连接至滤过液瓶。
6.6 、浓缩结束后页面会自动提示浓缩结束。此时如需要对浓缩的外泌体进行纯化,可加入 0.6 倍体积的生理盐水到样品瓶中,设定相应的参数,点击“START”按键进行纯化,去除多余的蛋白。
6.7 、重复上述 6.6 过程,即完成全部的纯化步骤。
7、 样品回收
1 、点击屏幕右上角的切换按键进行屏幕切换,切换至“COLLECTION”页面。并确认样品瓶放置在载物台上。
7.2 、点击“PUMP OUT”按键,进行样品回收。
7.3 、系统自动会自动确认将样品泵至收集瓶,并结束样品回收程序。
7.4 、如果由于样品瓶中液面低于管路,导致的样品瓶中部分浓缩液残留。可用物体对样品瓶进行单侧垫高,令液面高于进液管路,再次点击“PUMP OUT”按键。
7.5 、重复 7.4 直至样品完全回收入收集瓶。
7.6 、注:如果收集滤过液,则不需要执行此样品回收程序。
8、 样品回收后管路清
1、将两个手轮逆时针旋转,将过滤板上部抬升,而后取出滤膜丢弃。
8.2 、顺时针旋转手轮,将滤板压合,旋紧手轮。
8.3 、在“COLLECTION”页面,选择清洗的液体量,将各个管口归位至初始的位置(即与射流器连接位置),将去离子水放置在载物台上,连接 4 号管口与去离子水,5 号口连接废液缸。
8.4 、选择清洗量,点按“START”按键开始清洗,清洗完毕后,程序自动结束并显示清洗完成。
9、 样品回收后管路灭菌
9.1 、在“COLLECTION”页面选择灭菌时长,并点按“START”按键开始灭菌。
9.2 、灭菌结束后在主机的左侧前部有开关按钮,按压按钮后关闭主机
(保护主机的制冷模块,该模块与主机同时开启与关闭)
联系方式
联系人:张钰女士 (业务经理)
电 话:
86-010-82015225
打电话给我时,请一定说明在仪器批发网看到的,谢谢!
手 机: 需要登录后查看 马上登陆»
传 真: 86-010-82015131
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