体外无细胞蛋白快速表达系统

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　　RTS—一种高效的体外无细胞蛋白表达系统
　　
　　源自德国
　　
　　北京中生柏奥生物科技有限公司（www.ebaiao.com）推出一系列高效的体外无细胞蛋白表达试剂盒——RTS (Rapid Translation System)，可实现真核蛋白、原核蛋白、二硫键蛋白、Fab抗体片段、膜蛋白等各类蛋白的高效表达，反应体系分为小、中、大三种规格，最高可实现24小时内50mg蛋白表达。
　　
　　一、体外无细胞蛋白表达系统的原理
　　
　　体外无细胞蛋白表达利用大肠杆菌、麦胚或昆虫的细胞裂解物作为基本反应系统，去除裂解物中的核酸和蛋白，保留蛋白合成所必需的核糖体和酶系统等，进行目标蛋白的合成。PCR产物、质粒载体和mRNA都可以做为反应模板。
　　
　　反应体系可以是间歇式（batch）反应，在这种体系中，当反应进行4个小时左右时，由于底物的消耗和副产物的增多，反应受到抑制，因此间歇式反应时间一般为2-6小时。另外一种为CECF（Continuous Exchange Cell Free）体系，通过半透膜将反应体系分为反应室和供应室。反应底物和能量可以通过半透膜从供应室源源不断地向反应室提供，而反应产生的副产物通过半透膜扩散到供应室，保证了反应的长时间进行。这种CECF反应体系可以将反应时间延长到24小时，因此具有更高的产率。
　　
　　二、RTS体外无细胞蛋白表达系统的优势
　　
　　RTS无细胞蛋白表达系统通过对缓冲液系统和能量供应系统的优化，有效提高了蛋白合成的产率，称为高产HY（High Yield）系统。HY系统与CECF系统相结合，使RTS无细胞体外蛋白表达拥有无与伦比的优势：
　　
　　1，高产量：大肠杆菌500 CECF系统1ml反应体系蛋白产量高达6mg；
　　
　　2，省时：体外表达系统在2-6小时（batch系统）或24小时（CECF系统）可完成蛋白合成反应；
　　
　　3，高通量：体外蛋白合成系统可实现高通量蛋白合成；
　　
　　4，方便：可根据目标蛋白性质在反应体系中加入分子伴侣、去污剂及一些辅助因子，提高蛋白的溶解性和活性；
　　
　　5，自由：可根据实验需要，掺入荧光标记氨基酸、非天然氨基酸等；
　　
　　6，广泛：适用于毒蛋白的合成。