ES/iPS 细胞冻存液

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产品基本信息

产品名称	Applied Cell® ES/iPS 细胞冻存液
货号	AC-1001012
规格	100mL
运输保存条件	2-8 ℃
使用范围	多能干细胞（ES/iPS）冻存
保质期	24 个月

产品简介

ES/iPS 细胞冻存液是埃泽思生物（Applied Cell®）自主开发的一款无血清、无需程序降温的干细胞
冻存液，适用于人多能干细胞（hES/hiPS）的冻存。本产品生产过程遵循 ISO9001 体系,并符合 GMP 指导原则。

产品特性

 安全：无外源蛋白成分，大大降低各类病毒、霉菌和支原体等的污染风险。

 稳定：全程无血清生产，批次间差异小。

 高效：冻存细胞复苏率高于 90%。

 简单：即用型产品，且无需程序降温可直接-80℃过夜后转移至液氮中长期保存。

产品内容

组分	规格	数量	运输
ES/iPS 细胞冻存液 ES/iPS Cryopreservation Medium	100mL	1 瓶	冰袋

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即用型基质胶（Applied Cell®: Cat. no. C-1001007）

细胞冻存操作方法

1. 准备对数期生长的干细胞，加入人多能干细胞消化液（AC-1001008）消化 3~5 min，用 2mL
人多能干细胞培养基（AC-1001000）制备成细胞悬液；
2. 1200 rpm 3min 离心，弃上清，用 1.5-2mL ES/iPS 细胞冻存液重悬细胞，细胞密度 1×10⁶~1×10⁷/mL；
3. 转移至冻存管中，无需程序降温，直接将待冻存细胞置于 -80℃过夜，后转移至液氮中长期保存，冻
存时注意直立放置冻存管；

细胞复苏

1. 基质胶包被培养板：取出 6 孔板/12 孔板，每孔内加入 1 mL/0.5 mL 即用型基质胶（AC-1001007），轻轻晃动

6 孔板/12 孔板使基质胶完全覆盖皿底，置于 37℃培养箱中孵育 1h~2h，实验前拿出并置于超净工作台/生物安全柜中

室温下平衡 20min。如果暂时不用，可用 Parafilm 封口后 2-8℃ 储存，并于 1 周内使用。

注意：①一支冻存的干细胞的数量在 1×106cells/mL 左右，对应 6 孔板 1 孔；②即用型基质胶对温度敏感，即用即拿，

用完后立即放回 4℃冰箱保存，且勿用手直接触碰基质胶液面所及的瓶身，影响基质胶质量。

2. 先将 2~3mL 的干细胞培养基加入 15mL 离心管中备用。

3. 解冻：将从液氮中取出的冻存管快速浸入 37℃温水中，快速摇动，使其在 1~2min 内快速解冻；

注意：细胞从液氮中拿出的速度要快，尽量减少其暴露在室温中的时间。

4. 离心：冻存管中的冻存液解冻后，将其逐滴加入含有干细胞培养基的 15mL 离心管中，将 15mL 离心管置于低速离心机中配

平衡后，1200 rpm 离心 3min；

5. 重悬：离心后弃上清加 1mL 人多能干细胞培养基对干细胞沉淀进行吹吸混匀，吹吸 3~5 次左右。