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人多能干细胞消化液

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产品基本信息

产品名称
Applied Cell®人多能干细胞消化液
货 号
AC-1001008
规 格
 100mL
运输保存条件
2-8℃,冰袋运输
使用范围
人多能干细胞(ES/iPS)消化后传代、冻存
保质期
12 个月

产品简介

人多能干细胞消化液是埃泽思生物科技有限公司(Applied Cell®)自主研发的一款不含蛋白消化酶、专业应用于人多能干细胞消化传代的产品。本产品为温和高效型消化液,最大限度减少对干细胞消化损伤,传代存活率高,且消化时间 3-5min 即可,和传统细胞传代方法相比,简化细胞传代过程。本产品生产过程遵循 ISO9001 体系,并符合 GMP 指导原则。


产品特性

 温和高效,传代存活率高。
 简化细胞传代过程,省去挑克隆的操作。

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ES/iPS 细胞冻存液(Applied Cell®: Cat. no.AC-1001012)


操作方法(此次操作以 6 孔板为例)

1) 清洗:准备预传代细胞,贴边缓慢加入预热 2 mL PBS 缓冲液并轻轻晃动,然后沿培养皿边缘吸去 PBS
缓冲液。
2) 消化:在 6 孔板中加入 2 mL 消化液使之覆盖皿底,并置于 CO2 培养箱中孵育 2~5 min;
注意:细胞密度不同,消化时间略有调整,在显微镜下观察到大部分克隆边缘以及克隆内部细胞间出现间隙,

即刻吸掉消化液停止消化。

3) 吹打:吸掉人多能干细胞消化液后,立刻加入平衡好的 2mL 干细胞培养基,用移液枪呈扇形吹打 6
孔板底,吹吸次数保持在 3~5 次,使皿底贴附的干细胞集落脱落,轻柔缓慢吹吸混匀,制成干细胞悬液,

并将其转移到 15mL 离心管中;
注意:吹打细胞要轻柔,吹打次数在 3~5 次为宜,尽量避免形成单细胞。如有少量细胞无法从皿底
脱落,属于正常现象。如有大量细胞无法从皿底脱落,需延长消化时间。
4) 干细胞消化后,可以继续进行传代接种,也可以将干细胞进行冻存,步骤如下:
接种:1200 rpm/min 离心 3 min,弃上清,用室温平衡好的干细胞培养基缓吹打重悬细胞 5-10 次,
并转移至包被好的培养板中,每孔 2ml 培养基。接种后显微镜下观察干细胞密度以及细胞团块大小,
一般 4 个细胞以上的团块较合格,水平十字轻轻晃动 6 孔板,使细胞分布均匀。并置于 CO2 恒温培
养箱培养,第 2 天观察细胞贴壁情况,每 24h 换液一次。
冻存:1200 rpm/min 离心 3 min,弃上清,加入 2mL ES/iPS 细胞冻存液(AC-1001012),重悬
3~5 次后,将其加入到 2mL 冻存管中(注意:冻存液即用即拿,及时放回 4℃冰箱。)。在冻存管
上标记冻存细胞种类、时间、操作者及细胞批次,冻存管置于-80℃冰箱过夜,24h 后将其转至于液氮中进行长期保存

质量控制

检验项目
Test Catagories
参考数据
Reference Data
外观
Physical Appearance

无色液体

Colorless Liquid

澄清度
Clarity
澄清
Clear
pH 值
pH Value
7.0-7.4
渗透压
Osmolality
270-340
(mosm/KgH2O)
无菌
Sterility
无菌
Sterility
支原体
Mycoplasma
0.11um 过滤,支原体试验为阴性
The mycoplasma test was negative after 0.11um filtration



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